[PE2024381] NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ CRISPR/CAS9 CHỈNH SỬA PROMOTER OsSWEET14 NHẰM NÂNG CAO TÍNH KHÁNG BỆNH BẠC LÁ Ở GIỐNG LÚA BẮC THƠM 7 -33%

Upload bởi: DevNet27
(0 Đánh giá)
120,000đ
80,000đ

Luận án được hướng dẫn bởi GS.TS. Phạm Xuân Hội, và .TS.Nguyễn Duy Phương. Trong phần lời cảm ơn, tác giả bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đối với các cán bộ, lãnh đạo của các viện, trường đã tạo điều kiện và hỗ trợ trong quá trình thực hiện luận án. Tác giả cũng cảm ơn gia đình, người thân và đồng nghiệp đã luôn động viên, giúp đỡ trong suốt thời gian học tập và nghiên cứu.

Sinh học
Tài liệu
13/08/2024
[hotrodoan.vn]_luan_an_nghien_cuu_ung_dung_cong_nghe_crisprcas9_chinh_sua_p_.pdf
  • Chức năng đầy đủ và giống demo 100%

  • Hỗ trợ lắp đặt nếu cần

  • Hỗ trợ trả lời người mua sau khi tải

Kết luận 

1. Đã tối ưu được quy trình nuôi cấy in vitro và chuyển gen vào IE lúa BT7 thông qua A. tumafaciens. Quy trình sử dụng dung dịch A. tumefaciens có OD600 đạt 0,3 để lây nhiễm vào IE 11-13 DAP, AS 150 μM cho bước đồng nuôi cấy trong 5 ngày, kháng sinh cefotaxime 200 mg/L, vancomycin 100 mg/L và hygromycin 50 mg/L cho bước chọn lọc mô sẹo; hooc môn BAP 2 mg/L, NAA 0,2 mg/L và nước dừa 20% cho bước tái sinh chồi; hiệu suất chuyển gen đạt 20,67%. 2. Giống lúa BT7 mẫn cảm với 19/20 chủng VXO nghiên cứu, biểu hiện OsSWEET14 bị xâm nhiễm bởi 6 chủng VXO và chứa 4 EBE AvrXa7, PthXo3, Tal5 và TalC trên promoter OsSWEET14 trong hệ gen. Trình tự crRNA tác động vào 3 EBE AvrXa7, PthXo3 và Tal5 đã được ghép nối vào vector chuyển gen thực vật biểu hiện phức hệ CRISPR/Cas9. Vector tái tổ hợp đã được kiểm tra bằng PCR, cắt giới hạn và giải trình tự Nu. 
3. Đã tạo được 8 dòng lúa BT7 chỉnh sửa gen mang đột biến đồng hợp SW14- BT tại vị trí EBE AvrXa7, không chứa cấu trúc T-DNA trong hệ gen. Kiểu gen của các dòng lúa chỉnh sửa gen đã được khẳng định bằng PCR và giải trình tự SW14-BT. 
4. Đột biến SW14-BT trong các dòng lúa BT7 chỉnh sửa gen không gây ảnh hưởng tới một số đặc điểm nông sinh học chính của cây lúa, bao gồm thời gian sinh trưởng, chiều cao cây, số nhánh, số hạt chắc trên bông, hàm lượng amylose. Hai dòng lúa BT7 mang đột biến thêm 3 Nu và mất 6 Nu tại vị trí 15 và 16 trên EBE AvrXa7 không tăng cường biểu hiện OsSWEET14 khi lây nhiễm với 3 chủng VXO_11, 60 và 96, thể hiện tính kháng hoàn toàn với chủng VXO_11, kháng nhẹ với chủng VXO_96 và không kháng VXO_60

Đề nghị 

Trên cơ sở các kết luận rút ra từ kết quả nghiên cứu, chúng tôi đưa ra một số hướng nghiên cứu tiếp theo như sau: 
- Tiếp tục phân tích tính ổn định di truyền và khả năng kháng bệnh bạc lá của các dòng lúa BT7 chỉnh sửa SW14-BT. 
- Tiếp tục nghiên cứu cơ chế gây bệnh của quần thể VXO để xác định thêm các gen S/trình tự EBE mục tiêu phục vụ cho nghiên cứu tạo giống lúa BT7 chỉnh sửa gen kháng bệnh bạc lá phổ rộng
ĐIỂM TRUNG BÌNH
0
Xuất sắc (0)
Rất tốt (0)
Tốt (0)
Trung Bình (0)
Cần cải thiện (0)